westernblot显色底物是化学发光底物,显示方法有胶片(压片)法和化学发光(荧光)成像系统。
胶片法需要暗房,X光胶片,配置显影液、定影液,然后进行压片、显影、定影,要得到一个比较理想的图片,往往需要重复压片几次,操作非常繁琐,而且需要耗材。
化学发光(荧光)成像系统则超越了胶片法,不需要暗房、压片,关键的条带不会因为曝光不足或者曝光过度而丢失,而且该方法无耗材,图片结果为电子文档,方便存档和长期保存。
化学发光(荧光)成像系统专用冷CCD相机系列,与普通凝胶成像系统相比,其特点体现在:
1)高灵敏度CCD芯片:采用化学发光成像系统通用的高灵敏度CCD芯片。
2)高动态范围:CCD芯片选定后,相机的动态范围就由AD转换器决定,国际知名的化学发光成像系统均采用了16bitAD转换,而12bit的相机用于凝胶成像没问题,用于化学发光就不合适了。
3)低噪音:相机产生的噪音有二种,分别是热噪音和读出噪音,在降低热噪音方面,通过多级半导体制冷,使CCD芯片温度低于环境温度50°C左右,且温度可控,控温精度为±0.2°C,并可控制半导体制冷开关和风扇开关;在降低读出噪音方面,通常采用低噪音的16位A/D转换,同时反复优化电路设计,降低噪音。